一•  发现和命名

本中心与国家人类基因组北方研究中心合作，利用高通量的 NF- k B 信号通路细胞筛选平台，筛选发现人类新的未知基因 URP2SF （ GenBank 命名）能够抑制 NF- k B 通路的转录活性。

二•  结构和表达谱

URP2 （ U NC-112 r elated p rotein 2 ）是一类含有 FERM （ filopodin and ezrin/radixin/moesin ）和 PH （ pleckstrin homology ）结构域的蛋白家族成员之一。由于与线虫 UNC-112 序列高度的同源性而得名，此类蛋白家族中还包括 URP1 和 MIG2 。在蛋白质水平上， URP2 与 URP1 （ 58.7% ）和 MIG2 （ 67.9% ）具有高度的同源性。 FERM 结构域主要参与细胞骨架成分与跨膜蛋白的连接，含有 FERM 结构域的蛋白会通过这一结构域直接或间接地与胞浆膜相连，在细胞膜结构的形成与细胞黏附中发挥作用。 PH 结构域也作为细胞膜的锚定结构域，能够与磷酸肌醇相连，参与细胞信号转导蛋白间的相互作用。 URP2 有两种异构体，一种是编码 667 个氨基酸的 URP2LF （ URP2 long form ），另一种是编码 663 个氨基酸的 URP2SF （ URP2 short form ）。对于 URP2 基因的功能研究至今国内外未见报道。

人类 URP2SF 基因定位于 11q13.1 ，由 15 个外显子和 14 个内含子组成，剪切符合 GT-AG 规律。 cDNA 序列全长 2506 bp ，编码 663 个氨基酸。分子量 75.3 kDa ，预测的等电点为 6.3 。 URP2SF 进化保守，在人类、猩猩、猴、牛、马等物种中存在同源物。

将 URP2SF 基因序列送到 Unigene 数据库进行 EST 组织表达分析，发现该基因主要表达于免疫系统中。通过 Northern blot [1] 和 RT-PCR 证明了 URP2SF 的存在，我们的 RT-PCR 实验也验证了 URP2SF 表达于多种造血来源的细胞系，如 Jurkat 、 U937 、 Raji 和 K562 等。

三•  功能

通过构建 pEGFP-N1-URP2SF 质粒表达 GFP 融合蛋白显示， URP2SF 在细胞内呈全细胞定位。功能研究表明，过表达 URP2SF 能够抑制 NF- k B 通路的转录活性。 EMSA 实验显示， URP2SF 能够抑制 NF- k B 的核转位以及与 DNA 结合。此外，过表达 URP2SF 还能够诱导 HEK293T 和 HeLa 细胞出现了凋亡的特征，如染色体固缩和 PS 外翻。进一步研究提示，利用有效的 siRNA 下调 URP2SF 的内源性表达能够活化 NF- k B 通路，同时抑制 TNF-α 所诱导的细胞凋亡的发生。

综上所述， URP2SF 是一个新的 NF- k B 通路的抑制子，并且参与到细胞凋亡过程中。这是在国际上对 URP2SF 重要的生物学活性的首次报道 [2] ，深入对其基因、蛋白结构以及分子作用机制上的研究，将有助于阐明 URP2SF 参与 NF- k B 通路和细胞凋亡的关系，为 URP2SF 潜在的抗肿瘤的临床应用奠定基础。

四•  合作意想

目前，本中心正在进一步开展 URP2SF 的功能和分子作用机理的研究。本中心已经构建了 URP2SF 真核表达质粒、 GFP 细胞定位表达质粒、腺病毒表达克隆等，希望与基础以及临床研究的实验室合作开展 URP2SF 的功能研究，特别是在免疫靶标的临床应用方面。

联系人：石太平， Tel ： 67883332-868 ； Email ： taiping_shi@yahoo.com.cn

参考文献

•  Weinstein EJ, Bourner M, Head R, Zakeri H, Bauer C, Mazzarella R, URP1: a member of a novel family of PH and FERM domain-containing membrane-associated proteins is significantly over-expressed in lung and colon carcinomas. Biochim Biophys Acta. 2003, 1637: 207-216.

•  Wang L, Deng WW, Shi TP, Ma DL. URP2SF, a FERM and PH domain containing protein, regulates NF-kappaB and apoptosis. Biochem Biophys Res Commun. 2008 368(4): 899-906

北京大学人类疾病基因研究中心
2008.2.27